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在实验室进行柱层析的时候,由于样品的性质的不同,对于所使用的方法就会有所不同,涉及到各种填料以及所对应的各类流动相。对于一些大极性样品而言,我们需要添加一些修饰剂来防止样品拖尾,此次我们将为您分享一个使用Isolera系统对大极性碱性化合物进行分离纯化的案例,Flash纯化已成为小分子分离最有效最快速的技术,越来越多的科学家们正依赖Flash加快研发速度,提高速度,降低成本。
在我们的实际试验当中对于这种物质的提取来说,因为填充的材料为酸性,所以反应会较为强烈,目标信号峰会出现拖尾现象,最终影响所isolera收集的馏分纯度,同时馏分的溶剂后处理时间也会大大增加。解决这一问题的办法之一就是在流动相中加入相应的碱性修饰剂,如三乙胺;有时候一些拖尾问题也可以加入第三方溶剂解决,如二氯甲烷(DCM)或者丙酮(Acetone)。Isolera 全系列拥有第三方溶剂添加系统,可支持最多三种溶剂进行梯度洗脱。
这一功能可以很大程度上解决样品溶解性不好的问题,同时部分大极性样品拖尾问题也可以得到缓解。此次案例中,所使用的样品为尼古丁和咖啡因的混合物,不加三乙胺的条件下,由于巨大的吸附作用,样品没能够洗脱出来;所使用流动相为正庚烷和乙酸乙酯,通过Isolera系统添加三乙胺进行的正相硅胶分离,所添加三乙胺的比例为1%,样品成功洗脱出来,不过由于样品极性非常大,整个洗脱过程持续了30 CV。